TM9SF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406168-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TM9SF4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TM9SF4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TM9SF4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TM9SF4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TM9SF4 Anticorpo (A-3): sc-374473
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TM9SF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406168-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TM9SF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406168-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TM9SF4 (membro 4 da superfamília transmembranar 9) codifica uma proteína de membrana multipasso enriquecida em compartimentos endomembranares, onde tem sido associada à regulação do tráfego vesicular e da homeostase de organelos. A TM9SF4 tem sido implicada no controlo da maturação endossoma–lisossoma e em processos associados ao Golgi que influenciam a triagem de proteínas e a composição das membranas. Por meio dessas funções, a TM9SF4 pode afetar a renovação de recetores, a proteostase na superfície celular e programas de tráfego adaptativos ao stress. Alterações na expressão ou atividade da TM9SF4 têm sido associadas a fenótipos oncogénicos em alguns contextos, tornando-a relevante para estudos mecanísticos sobre aptidão de células tumorais, invasão e adaptação ao microambiente.
TM9SF4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TM9SF4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TM9SF4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TM9SF4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TM9SF4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.