TAAR5 Plasmide Double Nickase (h): sc-409205-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TAAR5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TAAR5 Double Nickase Plasmid (h) e il TAAR5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TAAR5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TAAR5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409205-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TAAR5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409205-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TAAR5 (recettore associato alle ammine in tracce 5) codifica un recettore accoppiato a proteine G di tipo rodopsina che rileva ammine biogene in tracce e ligandi odoranti correlati, contribuendo alla segnalazione chemosensoriale. Una volta attivato, TAAR5 è tipicamente associato a vie mediate da proteine G eterotrimeriche che modulano la segnalazione dei secondi messaggeri, come l’AMPc, e le conseguenti risposte trascrizionali a valle, integrando segnali provenienti da metaboliti extracellulari nella fisiologia cellulare. Sebbene sia stato caratterizzato soprattutto nei neuroni olfattivi, l’espressione di TAAR5 è stata riportata anche in alcuni tessuti periferici selezionati, a supporto di ruoli più ampi nelle reti di segnalazione neuromodulatoria e metabolica. Alterazioni della segnalazione della famiglia TAAR sono state studiate nel contesto di fenotipi neuropsichiatrici e differenze nell’elaborazione sensoriale, rendendo TAAR5 un bersaglio utile per studi meccanicistici della funzione dei GPCR e della segnalazione guidata dai ligandi.
TAAR5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TAAR5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TAAR5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TAAR5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TAAR5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.