SULT1C1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423200

Panoramica

Sult1c1 codifica la sulfotransferasi citosolica SULT1C1, un enzima di fase II del metabolismo degli xenobiotici che trasferisce un gruppo solfato dal PAPS a substrati contenenti gruppi ossidrilici e amminici. Questa reazione di solfatazione in genere aumenta la solubilità in acqua e modula la bioattività, il trasporto e l’eliminazione di piccole molecole, contribuendo così all’omeostasi chimica cellulare. Nei tessuti murini, SULT1C1 partecipa a processi coordinati di detossificazione e di segnalazione metabolica insieme ad altre vie di coniugazione, come la glucuronidazione e la coniugazione con il glutatione. Alterazioni dell’attività delle sulfotransferasi sono state associate a differenze nella suscettibilità allo stress chimico, nella gestione dei composti interferenti endocrini e nelle risposte tissutali legate all’infiammazione, rendendo Sult1c1 un bersaglio utile per studi di tossicologia meccanicistica e del metabolismo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SULT1C1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Sult1c1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Sult1c1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Sult1c1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SULT1C1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Sult1c1 per lo studio della segnalazione di SULT1C1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Sult1c1 critici per la funzione di SULT1C1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Sult1c1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SULT1C1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal SULT1C1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Sult1c1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SULT1C1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR SULT1C1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Sult1c1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Sult1c1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.