StARD10 Plasmide Double Nickase (h): sc-408191-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- StARD10 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il StARD10 Double Nickase Plasmid (h) e il StARD10 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira STARD10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: StARD10 Antibody (C-11): sc-365580
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
StARD10 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408191-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
StARD10 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408191-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STARD10 codifica StARD10, una proteina di trasferimento lipidico contenente un dominio START che lega i fosfolipidi e contribuisce alla gestione intracellulare dei lipidi e all’omeostasi delle membrane. È implicata nel coordinamento della segnalazione lipidica con il traffico vescicolare e la funzione degli organelli, processi che influenzano le vie di secrezione dell’insulina e una più ampia regolazione metabolica. Studi genetici e funzionali nell’uomo hanno collegato STARD10 alla suscettibilità alle malattie metaboliche, inclusi tratti associati al diabete di tipo 2, e un’alterata composizione lipidica è stata associata a disfunzione delle cellule β. Di conseguenza, STARD10 è spesso studiato nel contesto delle reti di segnalazione mediate dai lipidi, della fisiologia delle cellule endocrine e delle risposte di stress cellulare associate al metabolismo.
StARD10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus STARD10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di STARD10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di STARD10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con STARD10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.