Plásmido Doble Nickase (m) Sos 1: sc-423075-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Sos 1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sos 1 (m) y el plásmido de doble nickasa Sos 1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Sos1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sos 1 Anticuerpo (A-9): sc-17793
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Sos 1 | sc-423075-NIC | 20 µg | $410.00 |
SOS1 de ratón (Son of sevenless homolog 1) es un factor de intercambio de nucleótidos de guanina específico de Ras que convierte Ras-GDP en Ras-GTP aguas abajo de receptores tirosina quinasas activados. Mediante el reclutamiento a la membrana plasmática mediado por GRB2, SOS1 impulsa la señalización a través de la cascada RAS–RAF–MEK–ERK y contribuye a la modulación de la vía PI3K–AKT, conectando las señales de factores de crecimiento con la proliferación, la diferenciación y la remodelación del citoesqueleto. Sos1 también participa en el control por retroalimentación de la señalización de MAPK y ayuda a coordinar la dinámica de señalización de receptores en múltiples tejidos. La actividad desregulada de la vía SOS1–RAS es ampliamente relevante para la biología de la señalización oncogénica y para fenotipos del desarrollo asociados con una regulación aberrante de Ras/MAPK, lo que convierte a Sos1 en un nodo clave para estudios mecanísticos.
Sos 1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Sos1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Sos1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Sos1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Sos1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.