SLITRK4 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-414460

Panoramica

SLITRK4 codifica una proteina transmembrana neuronale della famiglia SLITRK, implicata nella crescita dei neuriti, nello sviluppo delle sinapsi e nei processi di adesione cellula–cellula che plasmano la formazione dei circuiti neurali. Attraverso motivi extracellulari a ripetizioni ricche di leucina e interfacce di segnalazione intracellulari, SLITRK4 è associata a vie che regolano la sinaptogenesi, il patterning di assoni e dendriti e la modulazione della connettività neuronale. I pattern di espressione nel sistema nervoso e l’omologia funzionale tra le proteine SLITRK supportano un ruolo in ambiti biologici rilevanti per il neurosviluppo e la neuropsichiatria. Alterazioni dell’attività della famiglia SLITRK sono state studiate nel contesto di disfunzioni a livello di circuito, rendendo SLITRK4 un bersaglio utile per studi meccanicistici in modelli neuronali.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SLITRK4 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SLITRK4 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SLITRK4 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SLITRK4 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SLITRK4.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SLITRK4 per lo studio della segnalazione di SLITRK4, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SLITRK4 critici per la funzione di SLITRK4
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SLITRK4 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SLITRK4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SLITRK4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SLITRK4. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SLITRK4 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SLITRK4 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SLITRK4 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SLITRK4 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.