Seipin Plasmide Double Nickase (h): sc-406865-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Seipin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Seipin Double Nickase Plasmid (h) e il Seipin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BSCL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Seipin Plasmide Double Nickase (h) | sc-406865-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Seipin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406865-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **BSCL2** codifica la seipina, una proteina di membrana del reticolo endoplasmatico che organizza la biogenesi delle gocce lipidiche e favorisce il corretto immagazzinamento dei triacilgliceroli coordinando i siti di contatto tra reticolo endoplasmatico e gocce lipidiche. La seipina influenza la differenziazione degli adipociti e le vie dell’omeostasi lipidica, collegando la sintesi dei lipidi neutri, il rimodellamento dei fosfolipidi e la dinamica delle membrane degli organelli. L’alterazione di **BSCL2** compromette la morfologia delle gocce lipidiche e l’equilibrio energetico cellulare, con una rilevanza consolidata per la lipodistrofia generalizzata congenita e per fenotipi neurodegenerativi associati alla seipina, inclusa la neuropatia motoria ereditaria distale e disturbi correlati. Queste connessioni rendono **BSCL2** un nodo utile per studiare il metabolismo lipidico, le risposte allo stress della proteostasi e la vulnerabilità specifica di determinati tipi cellulari.
Seipin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BSCL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BSCL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BSCL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BSCL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.