SAMC Plasmide Double Nickase (m): sc-426639-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SAMC Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SAMC Double Nickase Plasmid (m) e il SAMC Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Slc25a26. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SAMC Plasmide Double Nickase (m) | sc-426639-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc25a26 codifica SAMC (trasportatore di S-adenosilmetionina), un trasportatore della membrana interna mitocondriale che importa la S-adenosilmetionina nella matrice per sostenere le reazioni di metilazione intramitocondriale. Fornendo il donatore di metile alle metiltransferasi, SAMC collega il metabolismo a un carbonio al controllo dell’espressione genica mitocondriale, alla modifica di tRNA/rRNA e al mantenimento della capacità di fosforilazione ossidativa. Un’alterazione del trasporto mitocondriale di SAM può spostare l’equilibrio redox, modificare l’assemblaggio della catena respiratoria e compromettere l’adattamento metabolico nei tessuti ad alto consumo energetico. Questi processi sono rilevanti per studi sulla disfunzione mitocondriale, sui fenotipi neuromuscolari e su risposte più ampie allo stress metabolico in modelli murini.
SAMC Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Slc25a26 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Slc25a26. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Slc25a26. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Slc25a26 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.