RXRβ Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-422768

Panoramica

Rxrb codifica il recettore X dei retinoidi beta (RXRβ), un recettore nucleare attivato da ligandi che forma eterodimeri con molteplici partner, tra cui PPAR, LXR, FXR, VDR e RAR, per regolare programmi trascrizionali che controllano il metabolismo dei lipidi e del glucosio, la differenziazione cellulare e la segnalazione infiammatoria. RXRβ integra segnali derivati dai retinoidi e dai lipidi per modulare la trascrizione associata alla cromatina su specifici elementi di risposta, influenzando la funzione mitocondriale e l’equilibrio ossidativo nei tessuti metabolicamente attivi. Nei modelli murini, alterazioni dell’attività di Rxrb sono state collegate a una disregolazione dell’omeostasi metabolica e alla modulazione della risposta immunitaria, rendendolo rilevante per studi su steatosi, sensibilità all’insulina e meccanismi di malattie infiammatorie. Il suo ruolo centrale nel crosstalk tra recettori nucleari colloca inoltre RXRβ come nodo utile per analizzare le interazioni tra vie di segnalazione nello sviluppo e nella regolazione endocrina.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RXRβ (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Rxrb in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Rxrb insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Rxrb a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RXRβ.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Rxrb per lo studio della segnalazione di RXRβ, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Rxrb critici per la funzione di RXRβ
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Rxrb per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal RXRβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal RXRβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Rxrb. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal RXRβ Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR RXRβ (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Rxrb per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Rxrb definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.