Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RXRβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422768
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RXRβ El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RXRβ, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RXRβ Anticuerpo (11-13): sc-742
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RXRβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422768 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Rxrb codifica el receptor X de retinoides beta (RXRβ), un receptor nuclear activado por ligando que forma heterodímeros con múltiples socios, incluidos PPAR, LXR, FXR, VDR y RAR, para regular programas de transcripción que controlan el metabolismo de lípidos y glucosa, la diferenciación celular y la señalización inflamatoria. RXRβ integra señales derivadas de retinoides y lípidos para modular la transcripción asociada a la cromatina en elementos de respuesta, influyendo en la función mitocondrial y el equilibrio oxidativo en tejidos metabólicamente activos. En modelos murinos, la actividad alterada de Rxrb se ha vinculado con una homeostasis metabólica desregulada y con la modulación inmunitaria, lo que lo hace relevante para estudios de esteatosis, sensibilidad a la insulina y mecanismos de enfermedad inflamatoria. Su papel central en la interacción cruzada entre receptores nucleares también sitúa a RXRβ como un nodo para desentrañar interacciones de vías en el desarrollo y la señalización endocrina.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RXRβ (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Rxrb en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Rxrb junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Rxrb tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RXRβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Rxrb para la investigación de la señalización de RXRβ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Rxrb críticos para la función de RXRβ
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Rxrb para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RXRβ CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RXRβ CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Rxrb. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RXRβ (m) y el plásmido HDR RXRβ (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Rxrb para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Rxrb definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.