RIM-BP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406740
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RIM-BP2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RIM-BP2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RIM-BP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406740 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RIMBP2 codifica RIM-BP2, una proteína andamiaje de la zona activa presináptica que acopla los canales de Ca2+ dependientes de voltaje a la maquinaria de liberación de neurotransmisores mediante interacciones con proteínas RIM y otros componentes sinápticos. Al coordinar la entrada de Ca2+ con el acoplamiento (docking) y el cebado (priming) de las vesículas sinápticas, RIM-BP2 favorece una exocitosis eficiente evocada por potenciales de acción y la plasticidad sináptica a corto plazo en sinapsis excitadoras. Esta proteína participa en la señalización dependiente de Ca2+ en la terminal presináptica e influye en la dinámica del ciclo vesicular que determina la fuerza sináptica. Las alteraciones genéticas de RIMBP2 se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que la hace relevante para estudiar defectos de la transmisión sináptica y disfunciones a nivel de circuitos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RIM-BP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RIMBP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RIMBP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RIMBP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RIM-BP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RIMBP2 para la investigación de la señalización de RIM-BP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RIMBP2 críticos para la función de RIM-BP2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RIMBP2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RIM-BP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RIM-BP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RIMBP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RIM-BP2 (h) y el plásmido HDR RIM-BP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RIMBP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RIMBP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.