RGS6 Plasmide Double Nickase (h): sc-404102-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RGS6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RGS6 Double Nickase Plasmid (h) e il RGS6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RGS6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RGS6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404102-NIC | 20 µg | $410.00 |
RGS6 (Regolatore della segnalazione delle proteine G 6) è una proteina ad attività GTPasi-attivante che attenua la segnalazione dei GPCR accelerando l’idrolisi del GTP mediata da Gαi/o, contribuendo così a modellare ampiezza e durata delle vie delle proteine G eterotrimeriche. Attraverso la modulazione di reti di secondi messaggeri come cAMP/PKA e della segnalazione MAPK a valle, RGS6 concorre al controllo dell’eccitabilità cellulare, delle risposte allo stress e di segnali di sopravvivenza dipendenti dal contesto. RGS6 è stata collegata alla regolazione della segnalazione dopaminergica e colinergica, ed è stata studiata in processi rilevanti per la neurobiologia e la fisiologia cardiovascolare. Alterazioni dell’espressione o della funzione di RGS6 sono state associate a fenotipi rilevanti per la malattia, inclusi segnali aritmogeni, caratteristiche neuropsichiatriche e vie associate al cancro, a supporto del suo valore negli studi meccanicistici.
RGS6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RGS6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RGS6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RGS6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RGS6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.