RGS6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2): sc-404102-KO-2

Panoramica

RGS6 (regolatore della segnalazione delle proteine G 6) è una proteina umana della famiglia RGS che accelera l’idrolisi del GTP sulle subunità Gα attivate, ponendo così fine alla segnalazione mediata dai GPCR. Modula vie di secondi messaggeri, tra cui cAMP/PKA e la segnalazione dipendente dal calcio, influenzando l’eccitabilità neuronale, l’elettrofisiologia cardiaca e le risposte ai neurotrasmettitori. RGS6 è stato collegato alla regolazione dell’apoptosi e delle risposte allo stress ossidativo, e la sua disregolazione è studiata nel contesto di processi neurodegenerativi, della segnalazione associata alle aritmie e di vie legate ai tumori. In quanto terminatore della segnalazione dei GPCR, RGS6 rappresenta un nodo utile per analizzare la dinamica delle vie a valle dell’attivazione recettoriale e per mappare il crosstalk con le reti MAPK e di risposta allo stress.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS6 (h2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RGS6 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RGS6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RGS6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RGS6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RGS6 per lo studio della segnalazione di RGS6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni RGS6 critici per la funzione di RGS6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RGS6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal RGS6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal RGS6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RGS6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal RGS6 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR RGS6 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RGS6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RGS6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.