RGS17 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425225

Descripción general

Rgs17 codifica el regulador de la señalización de proteínas G 17 (RGS17), un miembro de la familia RGS que acelera la hidrólisis de GTP en las subunidades Gα para terminar la señalización mediada por GPCR. Al atenuar la actividad de las proteínas G heterotriméricas, RGS17 influye en la señalización de cAMP/PKA, en cascadas de quinasas aguas abajo y en programas transcripcionales vinculados a la comunicación neuronal y a las respuestas de células secretoras. En sistemas murinos, la alteración de la expresión de Rgs17 se ha asociado con cambios en fenotipos neuroconductuales y con redes de señalización desreguladas que se evalúan con frecuencia en modelos de biología tumoral y metástasis. Estas propiedades hacen de RGS17 un nodo útil para estudiar la amplitud de la señal de GPCR, el diálogo cruzado entre vías y las salidas transcripcionales dependientes del contexto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RGS17 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Rgs17 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Rgs17 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Rgs17 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RGS17.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Rgs17 para la investigación de la señalización de RGS17, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Rgs17 críticos para la función de RGS17
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Rgs17 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RGS17 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RGS17 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Rgs17. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RGS17 (m) y el plásmido HDR RGS17 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Rgs17 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Rgs17 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.