Plásmido Doble Nickase (h) Rad51D: sc-408085-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Rad51D consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Rad51D (h) y el plásmido de doble nickasa Rad51D (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RAD51D. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rad51D Anticuerpo (C-1): sc-398819
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Rad51D | sc-408085-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Rad51D | sc-408085-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD51D codifica Rad51D, un parálogo de RAD51 que funciona dentro del complejo BCDX2 para promover la recombinación homóloga (RH) y el reinicio de horquillas de replicación detenidas. Rad51D favorece la reparación de roturas de doble hebra del ADN, contribuye a la estabilidad genómica y se integra con la red de anemia de Fanconi/BRCA y con la señalización de los puntos de control durante las fases S y G2. Los defectos en RAD51D reducen la capacidad de RH, aumentan la inestabilidad cromosómica y se asocian con predisposición hereditaria al cáncer y con la tumorigénesis en múltiples contextos tisulares. Por ello, RAD51D se estudia ampliamente en las vías de respuesta al daño del ADN, en modelos de estrés replicativo y en análisis de estructura–función de complejos mediadores de la RH.
Rad51D El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RAD51D en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RAD51D. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RAD51D. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RAD51D alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.