Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab 18 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-417193
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Rab 18 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Rab 18, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Rab 18 Antibody (D-5): sc-393168
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Rab 18 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-417193 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
RAB18 codifica Rab18, una piccola GTPasi della famiglia Rab che regola il traffico intracellulare di membrane, con ruoli di rilievo all’interfaccia tra reticolo endoplasmatico (RE) e goccioline lipidiche. Rab18 coordina il trasporto vescicolare, l’ancoraggio degli organelli e la morfologia del RE tramite l’alternanza tra stati legati a GDP e a GTP e mediante interazioni con effettori associati alla membrana. L’alterazione del traffico dipendente da RAB18 può modificare l’omeostasi lipidica, la dinamica della via secretoria e i processi correlati all’autofagia. Studi genetici e funzionali hanno collegato la disfunzione di RAB18 a fenotipi di neurosviluppo e a risposte allo stress cellulare, supportandone la rilevanza in modelli della biologia delle malattie neurologiche e delle vie associate al metabolismo.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 18 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RAB18 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RAB18 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RAB18 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Rab 18.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RAB18 per lo studio della segnalazione di Rab 18, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni RAB18 critici per la funzione di Rab 18
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RAB18 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Rab 18 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Rab 18 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RAB18. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Rab 18 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Rab 18 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RAB18 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RAB18 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.