PPP2R3A Plasmide Double Nickase (h): sc-402433-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PPP2R3A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PPP2R3A Double Nickase Plasmid (h) e il PPP2R3A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PPP2R3A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PPP2R3A Plasmide Double Nickase (h) | sc-402433-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PPP2R3A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402433-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPP2R3A codifica PR130, una subunità regolatoria B″ della proteina fosfatasi 2A (PP2A) che contribuisce a dirigere l’assemblaggio dell’oloenzima PP2A, la sua localizzazione subcellulare e la selezione dei substrati. Attraverso la defosforilazione mediata da PP2A, PPP2R3A influenza il controllo, dipendente dalla fosforilazione, della progressione del ciclo cellulare, dell’organizzazione del citoscheletro e delle cascate di trasduzione del segnale che integrano input guidati dalle chinasi. Un’alterata regolazione di PP2A è ampiamente associata a una deregolazione dei segnali di crescita e di risposta allo stress, e modifiche nell’espressione o nella funzione di PPP2R3A sono state investigate nel contesto del rimodellamento di vie oncogeniche e di altri meccanismi patologici incentrati sulla fosforilazione. Di conseguenza, PPP2R3A è spesso studiato per chiarire come la specificità di PP2A plasmi gli output delle vie a valle e i fenotipi cellulari.
PPP2R3A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PPP2R3A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PPP2R3A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PPP2R3A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PPP2R3A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.