PICH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407026
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PICH O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PICH, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PICH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407026 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ERCC6L codifica a PICH, uma translocase de DNA dependente de ATP da família SNF2 que se localiza em pontes ultrafinas de DNA durante a anáfase e promove a segregação cromossômica fiel. A PICH coopera com vias de resposta a danos no DNA e de decatenação ao remodelar a cromatina e coordenar a resolução de cromátides-irmãs entrelaçadas, sustentando a estabilidade do genoma sob estresse de replicação. Ao regular a progressão mitótica e prevenir a segregação incorreta de cromossomos, a PICH influencia desfechos celulares ligados à aneuploidia e à instabilidade genômica. A atividade desregulada de ERCC6L/PICH tem sido associada a fenótipos proliferativos e é estudada no contexto da biologia do câncer e de outros distúrbios relacionados à manutenção do genoma.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PICH (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ERCC6L em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ERCC6L, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ERCC6L na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PICH.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ERCC6L para a investigação da sinalização de PICH, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ERCC6L críticos para a função PICH
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ERCC6L para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PICH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PICH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ERCC6L. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PICH Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PICH (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ERCC6L para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ERCC6L definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.