PHF10 Plasmide Double Nickase (h): sc-410593-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PHF10 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PHF10 Double Nickase Plasmid (h) e il PHF10 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PHF10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PHF10 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410593-NIC | 20 µg | $410.00 |
PHF10 (PHD finger protein 10) è un fattore associato alla cromatina, implicato nel rimodellamento della cromatina dipendente dall’ATP e nel controllo della trascrizione. È collegato alla forma PBAF (Polybromo-associated BRG1-associated factor) del complesso SWI/SNF, contribuendo alla regolazione di programmi di espressione genica che influenzano proliferazione cellulare, differenziamento e specificazione di linea. Attraverso i suoi ruoli nell’accessibilità della cromatina e nella funzione di promotori/enhancer, PHF10 aiuta a coordinare reti trascrizionali dello sviluppo e responsivi allo stress. La disregolazione dei componenti associati a SWI/SNF, incluse le assemblee contenenti PHF10, è rilevante negli studi sulla biologia del cancro e sui processi di neurosviluppo, in cui il rimodellamento della cromatina alterato e una ridotta fedeltà trascrizionale sono caratteristiche comuni.
PHF10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PHF10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PHF10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PHF10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PHF10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.