PBR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419383
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PBR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PBR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PBR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419383 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Tspo** de camundongo codifica o receptor benzodiazepínico periférico (PBR), uma proteína de 18 kDa localizada principalmente na membrana externa mitocondrial, que se liga ao colesterol e às porfirinas e contribui para a homeostase mitocondrial. O PBR participa do transporte de colesterol e do metabolismo esteroidogênico, regula a permeabilidade mitocondrial e a sinalização associada à apoptose e influencia o equilíbrio de espécies reativas de oxigênio e as respostas inflamatórias. A expressão de Tspo/PBR é enriquecida em micróglia ativada e em células imunes periféricas e é amplamente utilizada como marcador de neuroinflamação, com relevância adicional para a disfunção mitocondrial observada em transtornos neurodegenerativos e em contextos de estresse metabólico. Essas funções tornam o Tspo um alvo útil para dissecar redes de sinalização ligadas às mitocôndrias que conectam o estresse celular à ativação imune e à remodelação tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PBR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tspo em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tspo, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tspo na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PBR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tspo para a investigação da sinalização de PBR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tspo críticos para a função PBR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tspo para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PBR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PBR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tspo. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PBR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PBR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tspo para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tspo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.