Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Op18 Plasmide Double Nickase (h): sc-401656-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Op18 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Op18 Double Nickase Plasmid (h) e il Op18 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira STMN1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Op18 Antibody (E-3): sc-55531
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Op18 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401656-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Op18 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401656-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STMN1 codifica per la stathmina/oncoproteina 18 (Op18), una fosfoproteina citosolica che si lega agli eterodimeri di tubulina e promuove la catastrofe dei microtubuli, modulando così l’assemblaggio del fuso, la progressione mitotica e il traffico intracellulare. La sua attività è regolata dalla fosforilazione a valle di nodi di segnalazione che includono MAPK e PI3K/AKT, mettendo in relazione gli input dei fattori di crescita con la dinamica del citoscheletro e il controllo del ciclo cellulare. Un’espressione deregolata di STMN1 è frequentemente associata a fenotipi proliferativi e invasivi nella biologia dei tumori ed è stata anche collegata ad alterazioni della stabilità dei microtubuli neuronali in modelli di neurodegenerazione. Di conseguenza, STMN1 è ampiamente studiato in vie che regolano mitosi, migrazione e risposte allo stress che rimodellano la rete dei microtubuli.
Op18 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus STMN1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di STMN1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di STMN1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con STMN1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.