Plásmido Doble Nickase (h) NSUN4: sc-415742-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)NSUN4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NSUN4 (h) y el plásmido de doble nickasa NSUN4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NSUN4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) NSUN4 | sc-415742-NIC | 20 µg | $410.00 |
NSUN4 codifica una metiltransferasa mitocondrial de ARN citosina-5 que modifica el ARNr mitocondrial y favorece el ensamblaje y la estabilidad del ribosoma mitocondrial, promoviendo así una fosforilación oxidativa eficiente y la síntesis de proteínas de la cadena respiratoria. A través de su papel en la expresión génica mitocondrial, NSUN4 influye en la homeostasis bioenergética, el control de calidad de la traducción mitocondrial y la señalización adaptativa al estrés vinculada al metabolismo celular. La desregulación de la traducción mitocondrial y de la biogénesis ribosomal se ha asociado con fenotipos neuromusculares y del neurodesarrollo, y NSUN4 se estudia como un nodo que conecta la modificación epitranscriptómica del ARN con la disfunción mitocondrial. La investigación sobre NSUN4 también aporta información sobre mecanismos de proteostasis, equilibrio de especies reactivas de oxígeno y remodelación metabólica en contextos relevantes para enfermedades.
NSUN4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NSUN4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NSUN4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NSUN4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NSUN4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.