NRK Plasmide Double Nickase (m): sc-424201-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NRK Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NRK Double Nickase Plasmid (m) e il NRK Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Nrk. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NRK Plasmide Double Nickase (m) | sc-424201-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NRK Plasmide Double Nickase (m2) | sc-424201-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene **Nrk** del topo codifica la **Nik-related kinase (NRK)**, una chinasi proteica sierina/treonina coinvolta in reti di segnalazione che coordinano la proliferazione cellulare, le risposte allo stress e lo sviluppo dei tessuti. NRK è stata associata alla regolazione di cascate di chinasi, inclusi processi legati alla MAPK, e contribuisce al controllo dei programmi di crescita e differenziazione cellulare. Nel topo, la funzione di **Nrk** è particolarmente rilevante per lo sviluppo della placenta e la biologia del trofoblasto, rendendolo utile per studiare la regolazione dello sviluppo e la segnalazione all’interfaccia materno-fetale. La deregolazione della segnalazione chinasica che coinvolge NRK è stata investigata in contesti di crescita anomala e di vie correlate al cancro, a sostegno della sua rilevanza per la modellizzazione meccanicistica delle malattie nella ricerca biomedica.
NRK Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Nrk nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Nrk. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Nrk. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Nrk interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.