NFκB p52/p100/NFKB2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400418-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NFκB p52/p100/NFKB2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NFκB p52/p100/NFKB2 Double Nickase Plasmid (h) e il NFκB p52/p100/NFKB2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NFKB2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NFκB p52/p100/NFKB2 Antibody (C-5): sc-7386
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NFκB p52/p100/NFKB2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400418-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NFκB p52/p100/NFKB2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400418-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFKB2 codifica il precursore NFκB p100, che viene processato nella subunità p52, un regolatore trascrizionale centrale della via non canonica di NF-κB. Attraverso un processamento regolato di p100 a valle di recettori quali BAFFR, CD40 e LTβR, NFKB2 controlla la maturazione delle cellule B, l’organogenesi dei tessuti linfoidi, la segnalazione citochinica e i programmi di sopravvivenza. La sua attività si integra con la segnalazione IKKα–NIK, con dimeri contenenti RelB e con il crosstalk con le risposte canoniche di NF-κB, plasmando l’espressione genica infiammatoria e immunitaria. Una segnalazione NFKB2 deregolata è stata associata a disfunzioni immunitarie e alla biologia delle neoplasie linfoidi, rendendolo un bersaglio frequente per studi meccanicistici su segnalazione, controllo trascrizionale e decisioni di destino cellulare.
NFκB p52/p100/NFKB2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NFKB2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NFKB2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NFKB2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NFKB2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.