Neurogenin 2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419233

Panoramica

Neurog2 codifica il fattore di trascrizione basic helix–loop–helix Neurogenin 2, un regolatore maestro dell’impegno verso la linea neuronale durante lo sviluppo embrionale del topo. Neurogenin 2 attiva programmi di espressione di geni proneurali e coordina l’uscita dal ciclo cellulare, la differenziazione neuronale e la migrazione attraverso reti trascrizionali che si interfacciano con la segnalazione Notch e con fattori bHLH a valle. È fondamentale per la specificazione di molteplici sottotipi neuronali nel sistema nervoso centrale e periferico in sviluppo e per la tempistica della neurogenesi. Programmi dipendenti da NEUROG2 deregolati sono stati implicati in fenotipi del neurosviluppo e in stati alterati di differenziazione neuronale, rilevanti per la modellizzazione dei disturbi cerebrali dello sviluppo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Neurog2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Neurog2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Neurog2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Neurogenin 2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Neurog2 per lo studio della segnalazione di Neurogenin 2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Neurog2 critici per la funzione di Neurogenin 2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Neurog2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Neurogenin 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Neurogenin 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Neurog2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Neurogenin 2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Neurogenin 2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Neurog2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Neurog2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.