NEIL3 Plasmide Double Nickase (h): sc-406572-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NEIL3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NEIL3 Double Nickase Plasmid (h) e il NEIL3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NEIL3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NEIL3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406572-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NEIL3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406572-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEIL3 (endonucleasi VIII-like 3) è una DNA glicosilasi/liasi AP che avvia la riparazione per escissione di basi riconoscendo e rimuovendo lesioni ossidative del DNA, con una preferenza per lesioni presenti in strutture di DNA a singolo filamento o associate alla replicazione. Contribuisce al mantenimento del genoma durante la fase S limitando lo stress replicativo e promuovendo la stabilità della forcella di replicazione, collegando l’attività di NEIL3 al coordinamento della risposta al danno al DNA e alla progressione del ciclo cellulare. La funzione di NEIL3 si intreccia con vie che regolano lo stress ossidativo, la riparazione associata alla cromatina e il mantenimento dell’integrità genomica nelle cellule proliferanti. Alterazioni dell’espressione o della funzione di NEIL3 sono state associate a una capacità di riparazione del DNA disregolata e a fenotipi di instabilità genomica rilevanti per studi di biologia tumorale e del danno ossidativo associato alla neurodegenerazione.
NEIL3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NEIL3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NEIL3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NEIL3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NEIL3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.