Nap-22 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (r): sc-437379

Panoramica

Nap-22 (nota anche come BASP1) è una proteina associata alla membrana, arricchita nei neuroni, implicata nella regolazione della crescita assonale, dell’estensione dei neuriti e della funzione sinaptica attraverso interazioni con fosfolipidi e complessi di segnalazione a livello della membrana plasmatica. Partecipa alla plasticità neuronale dipendente dall’attività ed è stata collegata all’organizzazione del citoscheletro e a processi di traffico vescicolare che modellano la dinamica del cono di crescita. Nap-22 è stata inoltre studiata nel contesto della regolazione trascrizionale tramite interazioni nucleari, collegando segnali extracellulari a programmi di espressione genica rilevanti per la differenziazione neuronale. Un’alterata espressione o localizzazione di Nap-22 è stata associata ad ambiti di ricerca neuro-sviluppo e neurodegenerazione in cui risultano compromessi la segnalazione di membrana e il rimodellamento sinaptico.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Nap-22 (r) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene in linee cellulari rat. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Nap-22.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di per lo studio della segnalazione di Nap-22, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni critici per la funzione di Nap-22
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Nap-22 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r) e dal Nap-22 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus . Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Nap-22 Plasmide HDR (r) e il plasmide HDR Nap-22 (r2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.