NanogNB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418788

Descripción general

NANOGNB (NanogNB) es un gen humano relacionado con NANOG implicado en programas reguladores vinculados a la pluripotencia y a la expresión génica del desarrollo temprano. Como parálogo/factor relacionado con el circuito central de la “stemness”, NanogNB se estudia en el contexto del control transcripcional, la especificación del destino celular y el mantenimiento del estado epigenético, con posible comunicación cruzada con vías que regulan la autorrenovación y la diferenciación. La expresión alterada de genes de la familia NANOG se evalúa con frecuencia en modelos de plasticidad de células tumorales, biología de células germinales y reprogramación, donde los cambios en redes transcripcionales de tipo “stem” pueden influir en la proliferación y el compromiso de linaje. Por lo tanto, NANOGNB sirve como diana para dilucidar cómo la arquitectura reguladora asociada a NANOG contribuye a procesos del desarrollo y a fenotipos celulares relevantes para enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NanogNB (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NANOGNB en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NANOGNB junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NANOGNB tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NanogNB.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NANOGNB para la investigación de la señalización de NanogNB, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NANOGNB críticos para la función de NanogNB
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NANOGNB para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NanogNB CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NanogNB CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NANOGNB. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NanogNB (h) y el plásmido HDR NanogNB (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NANOGNB para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NANOGNB definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.