NALP10 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406528

Panoramica

NLRP10 (NALP10) è un membro della famiglia dei recettori NOD-like, implicato nella regolazione della segnalazione immunitaria innata e dell’omeostasi infiammatoria. A differenza degli NLR canonici che formano inflammasomi, NLRP10 è stato associato, in modo dipendente dal contesto, alla modulazione della trascrizione dipendente da NF-κB, delle risposte citochiniche e al controllo di output associati all’inflammasoma. Contribuisce alla funzione delle cellule presentanti l’antigene, includendo effetti sulla migrazione delle cellule dendritiche e sul priming dei linfociti T, collocando NLRP10 in vie che plasmano attivazione immunitaria e tolleranza. Alterazioni dell’attività di NLRP10 sono state associate a disregolazione immunitaria e fenotipi infiammatori, a supporto del suo impiego come bersaglio per studi meccanicistici in immunologia e in modelli di risposta dell’ospite.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO NALP10 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene NLRP10 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del NLRP10 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto NLRP10 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina NALP10.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di NLRP10 per lo studio della segnalazione di NALP10, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni NLRP10 critici per la funzione di NALP10
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di NLRP10 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal NALP10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal NALP10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus NLRP10. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal NALP10 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR NALP10 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia NLRP10 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio NLRP10 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.