Mucin 6/MUC6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402946

Descripción general

MUC6 codifica la mucina 6, una mucina secretada, fuertemente O‑glicosilada y formadora de gel que contribuye a la barrera protectora de moco en las superficies epiteliales. A través de sus extensas estructuras de glicanos y de la formación de una matriz polimérica, MUC6 ayuda a regular la hidratación, la viscosidad y las interacciones con microbios y factores luminales, modelando la homeostasis mucosa y la defensa innata. Su expresión se asocia con la diferenciación epitelial y con programas de biosíntesis de mucinas que se conectan con las vías de glicosilación del RE/Golgi y con procesos de mantenimiento de la barrera. La expresión desregulada de MUC6 y los patrones alterados de glicosilación de mucinas se asocian con lesión inflamatoria y remodelado epitelial en enfermedades gastrointestinales y otras enfermedades relacionadas con mucosas, y con frecuencia se evalúan como biomarcadores de linaje y de estados de células mucosas en biología del cáncer.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Mucin 6/MUC6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MUC6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MUC6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MUC6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Mucin 6/MUC6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MUC6 para la investigación de la señalización de Mucin 6/MUC6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MUC6 críticos para la función de Mucin 6/MUC6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MUC6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Mucin 6/MUC6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Mucin 6/MUC6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MUC6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Mucin 6/MUC6 (h) y el plásmido HDR Mucin 6/MUC6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MUC6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MUC6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.