Plásmido Doble Nickase (h) Mucin 1/MUC1: sc-416876-NIC

MUC1 codifica la mucina 1, una mucina transmembrana de tipo I fuertemente O‑glicosilada que se expresa en la superficie apical de muchos tejidos epiteliales, donde contribuye a la función de barrera, la hidratación y la protección frente al estrés ambiental. A través de su cola citoplasmática, MUC1 participa en redes de señalización que regulan la polaridad celular, la adhesión y las respuestas transcripcionales, e intersecta con vías como la señalización de receptores tirosina cinasa y procesos posteriores asociados a MAPK/PI3K. Las alteraciones en la expresión, la localización o las glicoformas de MUC1 se vinculan con frecuencia a la desorganización epitelial y a interacciones inmunitarias perturbadas en contextos inflamatorios y neoplásicos. En consecuencia, MUC1 se estudia ampliamente como un modulador de la homeostasis epitelial, la biología de las células tumorales y la señalización microambiental dependiente de mucinas.

Mucin 1/MUC1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MUC1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MUC1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MUC1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MUC1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.