Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Mnk2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401879-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Mnk2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Mnk2 Double Nickase Plasmid (h) e il Mnk2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MKNK2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Mnk2 Antibody (B-6): sc-271559
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Mnk2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401879-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mnk2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401879-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MKNK2 codifica la chinasi 2 serina/treonina interagente con le MAP chinasi (MAP kinase–interacting serine/threonine-protein kinase 2, Mnk2), un effettore a valle della segnalazione ERK e p38 MAPK che integra segnali mitogenici e di stress nel controllo della traduzione dell’mRNA. Mnk2 fosforila eIF4E in Ser209, influenzando l’inizio della traduzione cap-dipendente e la traduzione selettiva di trascritti coinvolti in crescita, infiammazione e risposte allo stress. Integrandosi con la cascata MAPK e con il macchinario di controllo della traduzione, Mnk2 contribuisce alla regolazione di proliferazione, sopravvivenza e programmi di segnalazione guidati dalle citochine. La deregolazione dell’asse MNK–eIF4E è stata associata a pattern alterati di espressione genica oncogenica e infiammatoria, rendendo MKNK2 un nodo rilevante per studi meccanicistici sul controllo della traduzione legato alle patologie.
Mnk2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MKNK2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MKNK2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MKNK2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MKNK2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.