MGRN1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421607

Descripción general

Mgrn1 codifica la ligasa E3 de ubiquitina MGRN1, un regulador del recambio proteico dependiente de ubiquitina y del tráfico endosomal–lisosomal en neuronas y otros tipos celulares. MGRN1 modula la clasificación de proteínas de membrana y la homeostasis de receptores, vinculando la ubiquitinación con el transporte vesicular y las vías de proteostasis. En ratón, la alteración de la función de Mgrn1 se ha asociado con fenotipos de neurodegeneración y anomalías de pigmentación, lo que respalda su relevancia para estudios del mantenimiento neuronal y la biología del melanosoma. Desentrañar la señalización de ubiquitina dependiente de MGRN1 es útil para comprender cómo los defectos en el control de calidad proteico y el tráfico contribuyen a las respuestas celulares al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MGRN1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mgrn1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mgrn1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mgrn1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MGRN1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mgrn1 para la investigación de la señalización de MGRN1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Mgrn1 críticos para la función de MGRN1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mgrn1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MGRN1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MGRN1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mgrn1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MGRN1 (m) y el plásmido HDR MGRN1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mgrn1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mgrn1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.