METTL11B Plasmide Double Nickase (h): sc-414653-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- METTL11B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il METTL11B Double Nickase Plasmid (h) e il METTL11B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira METTL11B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
METTL11B Plasmide Double Nickase (h) | sc-414653-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
METTL11B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-414653-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
METTL11B codifica una presunta metiltransferasi dipendente dalla S-adenosilmetionina, implicata nella metilazione delle proteine e in una più ampia regolazione di tipo epigenetico della funzione del proteoma. In quanto membro degli enzimi “methyltransferase-like”, METTL11B è studiato per i suoi potenziali ruoli nel modulare la stabilità proteica, la localizzazione subcellulare e le reti di interazione che influenzano la crescita cellulare e le risposte allo stress. Vie associate alla metilazione deregolate sono frequentemente collegate a programmi trascrizionali alterati e a segnalazione aberrante in contesti oncologici e di neurosviluppo, rendendo METTL11B un gene di interesse per studi meccanicistici. Gli sforzi in corso di annotazione funzionale mirano a chiarirne i substrati e il contributo a processi cellulari conservati, dipendenti dalla metilazione, nelle cellule umane.
METTL11B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus METTL11B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di METTL11B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di METTL11B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con METTL11B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.