Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Menin Plasmide Double Nickase (m): sc-421626-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Menin Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Menin Double Nickase Plasmid (m) e il Menin Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Men1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Menin Antibody (B-9): sc-374371
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Menin Plasmide Double Nickase (m) | sc-421626-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Menin Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421626-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Men1 codifica la menina, una proteina scaffold prevalentemente nucleare che integra il controllo trascrizionale con la regolazione della cromatina. La menina si associa a complessi che modificano gli istoni, inclusi i metiltransferasi H3K4 della famiglia MLL/COMPASS, per modulare programmi genici coinvolti nel controllo del ciclo cellulare, nella specificazione di linea e nell’omeostasi dei tessuti endocrini. Attraverso interazioni con fattori di trascrizione e proteine associate alla riparazione del DNA, la menina influenza le risposte allo stress replicativo e la stabilità del genoma. L’alterazione della funzione di MEN1 è collegata alla biologia delle neoplasie endocrine e a reti trascrizionali modificate, rendendo Men1 un nodo chiave per modellare le vie oncosoppressori nei sistemi murini.
Menin Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Men1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Men1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Men1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Men1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.