Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LZTR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404531
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LZTR1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico LZTR1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LZTR1 Antibody (E-12): sc-390166
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LZTR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-404531 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
LZTR1 (leucine zipper–like transcription regulator 1) codifica una proteina della famiglia BTB-Kelch che si localizza prevalentemente nell’apparato di Golgi e funge da adattatore di substrato per complessi E3 ubiquitina-ligasi basati su CUL3. Attraverso il controllo, dipendente dall’ubiquitina, della stabilità proteica, LZTR1 modula la segnalazione della via RAS/MAPK regolando il turnover e l’organizzazione spaziale delle GTPasi della famiglia RAS e di componenti di segnalazione correlati. Questo gene è collegato a processi cellulari che includono la trasduzione del segnale, la proteostasi e il traffico vescicolare, con effetti a valle sui programmi di proliferazione e differenziamento. Alterazioni genetiche di LZTR1 sono state associate a fenotipi correlati alle RASopatie e a contesti di predisposizione tumorale, a supporto della sua rilevanza per studi meccanicistici sulla segnalazione RAS aberrante.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LZTR1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene LZTR1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del LZTR1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto LZTR1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LZTR1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di LZTR1 per lo studio della segnalazione di LZTR1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni LZTR1 critici per la funzione di LZTR1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di LZTR1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal LZTR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal LZTR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus LZTR1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal LZTR1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR LZTR1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia LZTR1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio LZTR1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.