LTBP-4 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405419

Panoramica

LTBP4 codifica per la latent transforming growth factor beta binding protein 4 (LTBP-4), una glicoproteina della matrice extracellulare che si associa alle microfibrille di fibrillina e regola il sequestro, l’immagazzinamento e la biodisponibilità dei complessi latenti di TGF-β. Attraverso queste interazioni, LTBP-4 influenza la dinamica della segnalazione della via del TGF-β e contribuisce ai programmi di assemblaggio e rimodellamento della matrice che modellano l’adesione cellulare, la meccanotrasduzione e l’elasticità dei tessuti. La funzione di LTBP4 è strettamente legata all’omeostasi delle fibre elastiche grazie al coordinamento con l’elastina e con i componenti microfibrillari, con effetti sull’integrità strutturale dei tessuti connettivi. L’alterazione genetica o l’espressione modificata di LTBP4 è stata implicata in fenotipi del tessuto connettivo e cardiopolmonari, a supporto della sua rilevanza per lo studio della biologia della matrice extracellulare e dei meccanismi di malattia dipendenti dal TGF-β.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LTBP-4 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene LTBP4 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del LTBP4 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto LTBP4 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LTBP-4.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di LTBP4 per lo studio della segnalazione di LTBP-4, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni LTBP4 critici per la funzione di LTBP-4
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di LTBP4 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal LTBP-4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal LTBP-4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus LTBP4. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal LTBP-4 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR LTBP-4 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia LTBP4 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio LTBP4 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.