LRP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400844

概要

LRP6（low-density lipoprotein receptor-related protein 6）は、カノニカルなWnt/β-カテニンシグナル伝達に必須の一回膜貫通型共受容体であり、Frizzled受容体とリガンド依存的に複合体を形成してDishevelledのリクルートを促進し、β-カテニン分解複合体の抑制に寄与します。この経路を介してLRP6は、胚のパターニング、幹細胞の維持、細胞増殖と分化を制御し、受容体の利用可能性を調節するDKKやスクレロスチンなどの細胞外アンタゴニストからのシグナルも統合できます。LRP6の活性や発現の変化は、がん生物学、骨・代謝表現型、神経発生過程など多様な文脈で観察されるWntシグナルの破綻と関連付けられています。膜近傍のシグナル伝達ノードとして、LRP6はしばしば、受容体輸送、シグナロソームの組み立て、β-カテニン下流の転写プログラムに影響する経路間クロストークを解明するために解析対象となります。

LRP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLRP6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LRP6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LRP6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LRP6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LRP6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LRP6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LRP6の機能に不可欠なLRP6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LRP6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LRP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLRP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LRP6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LRP6 HDRプラスミド（h）および LRP6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLRP6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLRP6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。