LPLUNC3 Plasmide Double Nickase (h): sc-406344-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LPLUNC3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LPLUNC3 Double Nickase Plasmid (h) e il LPLUNC3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BPIFB3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LPLUNC3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406344-NIC | 20 µg | $410.00 |
BPIFB3 codifica LPLUNC3, una proteina secreta contenente un dominio “bactericidal/permeability-increasing fold”, arricchita negli epiteli mucosali, dove è collegata alla difesa innata di barriera e alla regolazione dell’omeostasi della superficie delle vie aeree e del tratto aerodigestivo superiore. LPLUNC3 è associata a programmi di differenziazione epiteliale e alle interazioni ospite–microbo, con una potenziale influenza sulle reti di segnalazione infiammatoria che modellano l’immunità mucosale. Un’espressione alterata di BPIFB3 è stata riportata in contesti di rimodellamento epiteliale e infiammazione, a supporto del suo impiego come readout molecolare nella biologia delle vie aeree e in modelli legati alle infezioni. L’analisi funzionale di BPIFB3 può contribuire a chiarire come i fattori secreti dall’epitelio partecipino all’attività antimicrobica, ai fenotipi mucosi/secretori e al tono infiammatorio.
LPLUNC3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BPIFB3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BPIFB3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BPIFB3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BPIFB3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.