LOXL2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401021-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LOXL2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LOXL2 Double Nickase Plasmid (h) e il LOXL2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LOXL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LOXL2 Antibody (3C5): sc-293427
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LOXL2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401021-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LOXL2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401021-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LOXL2 (lysyl oxidase like 2) codifica un’amino-ossidasi secreta, rame-dipendente, che catalizza la deaminazione ossidativa dei residui di lisina in collagene ed elastina, favorendo la reticolazione della matrice extracellulare e il rimodellamento tissutale. Oltre alla maturazione della matrice, LOXL2 influenza l’adesione e la migrazione cellulare, nonché la meccanotrasduzione, modellando la rigidità della matrice e la segnalazione dipendente dalle integrine; inoltre è stata collegata a programmi di transizione epitelio-mesenchimale e a reti di risposta all’ipossia. Un’espressione o un’attività deregolata di LOXL2 è associata al rimodellamento fibrotico e alle dinamiche del microambiente tumorale, rendendola un nodo utile per studiare la biologia della matrice extracellulare, il crosstalk stroma-epitelio e i fenotipi legati all’invasione in sistemi cellulari umani.
LOXL2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LOXL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LOXL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LOXL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LOXL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.