LMO4 Plasmide Double Nickase (m): sc-421448-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LMO4 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LMO4 Double Nickase Plasmid (m) e il LMO4 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Lmo4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LMO4 Antibody (4H8): sc-293440
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LMO4 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421448-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LMO4 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421448-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lmo4 codifica LIM domain only 4 (LMO4), una proteina adattatrice nucleare “LIM-only” che assembla complessi trascrizionali multiproteici e modula programmi di espressione genica dipendenti dal contesto. Nei tessuti murini, LMO4 contribuisce alla definizione dei pattern di sviluppo e alle decisioni di destino cellulare coordinando le interazioni tra i partner di legame dei domini LIM e altri regolatori trascrizionali, influenzando processi quali differenziamento, proliferazione e funzione neuronale. LMO4 è stata collegata a vie che controllano la regolazione trascrizionale e l’integrazione dei segnali, incluse reti implicate nello sviluppo epiteliale e neurale. Un’attività disregolata di LMO4 è stata associata a un controllo trascrizionale aberrante osservato in modelli di tumorigenesi e in fenotipi neuroevolutivi, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico negli studi di regolazione genica.
LMO4 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Lmo4 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Lmo4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Lmo4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Lmo4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.