Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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KLC1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401881-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KLC1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il KLC1 Double Nickase Plasmid (h) e il KLC1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KLC1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: KLC1 Antibody (L2): sc-58776
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KLC1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401881-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KLC1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401881-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLC1 codifica la catena leggera 1 della chinesina, una subunità accessoria della chinesina-1 che collega gli adattatori di carico al motore KIF5 per guidare il trasporto ATP-dipendente lungo i microtubuli. Attraverso interazioni con vescicole, mitocondri, endosomi e complessi RNA/proteina, KLC1 contribuisce al traffico polarizzato necessario per la crescita dei neuriti, il mantenimento sinaptico e la distribuzione degli organelli. Il trasporto assonale regolato da KLC1 si integra con la dinamica del citoscheletro e con la segnalazione intracellulare che coordinano l’omeostasi neuronale e le risposte allo stress. L’alterazione della gestione del carico da parte della chinesina-1 e i difetti di trasporto sono spesso studiati nel contesto dei processi neurodegenerativi e di altri disturbi caratterizzati da un traffico intracellulare compromesso.
KLC1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KLC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KLC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KLC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KLC1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.