KIF2A Plasmide Double Nickase (h): sc-405146-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KIF2A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il KIF2A Double Nickase Plasmid (h) e il KIF2A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KIF2A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: KIF2A Antibody (D-7): sc-271471
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KIF2A Plasmide Double Nickase (h) | sc-405146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KIF2A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIF2A codifica una depolimerasi dei microtubuli della famiglia chinesina-13 che regola la dinamica dell’estremità “plus” dei microtubuli, l’assemblaggio del fuso e la segregazione dei cromosomi durante la mitosi, sostenendo una corretta progressione del ciclo cellulare. In contesti post-mitotici, KIF2A contribuisce alla guida assonale, alla migrazione neuronale e allo sviluppo sinaptico rimodellando le reti di microtubuli e coordinando l’organizzazione del citoscheletro. Collegamenti funzionali collocano KIF2A in processi legati al trasporto basato sui microtubuli e al checkpoint mitotico, che influenzano la stabilità del genoma e la polarità cellulare. Un’attività dis-regolata di KIF2A è stata associata a fenotipi di neurosviluppo ed è frequentemente studiata in ambiti rilevanti per il cancro, in cui alterazioni della dinamica dei microtubuli influenzano proliferazione e aneuploidia.
KIF2A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KIF2A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KIF2A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KIF2A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KIF2A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.