Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ING1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402893-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ING1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ING1 Double Nickase Plasmid (h) e il ING1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ING1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ING1 Antibody (E-10): sc-373817
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ING1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402893-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ING1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402893-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ING1 (inhibitor of growth family member 1) codifica una proteina nucleare associata alla soppressione tumorale che funziona come “lettore” della cromatina tramite il suo dominio PHD finger, riconoscendo H3K4me3 e coordinando il controllo trascrizionale ed epigenetico. ING1 integra segnali provenienti dal danno al DNA e dalle vie di risposta allo stress cellulare, collegando le risposte p53-dipendenti alla regolazione della progressione del ciclo cellulare, dell’apoptosi e della senescenza. Partecipa al rimodellamento della cromatina e a complessi di acetilazione/deacetilazione degli istoni, contribuendo a modellare programmi di espressione genica che mantengono la stabilità del genoma. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ING1 sono state riportate in molteplici neoplasie e vengono studiate nel contesto di una ridotta capacità di riparazione del DNA e di un controllo della crescita deregolato.
ING1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ING1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ING1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ING1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ING1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.