IGFBP6 Plasmide Double Nickase (h): sc-404768-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IGFBP6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IGFBP6 Double Nickase Plasmid (h) e il IGFBP6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IGFBP6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IGFBP6 Antibody (1A8): sc-293295
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IGFBP6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404768-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404768-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGFBP6 codifica la proteina 6 legante il fattore di crescita insulino-simile (insulin-like growth factor binding protein 6), un regolatore secreto ad alta affinità per IGF-II che modula la biodisponibilità degli IGF e la segnalazione a valle guidata da IGF1R. Tamponando l’IGF-II extracellulare, IGFBP6 influenza l’attività delle vie PI3K–AKT e MAPK, incidendo sui programmi di proliferazione, sopravvivenza e differenziamento cellulare. IGFBP6 è stata inoltre collegata alla migrazione e alle interazioni con la matrice extracellulare, a supporto di ruoli nel rimodellamento tissutale e nel dialogo tra cellula e microambiente. Un’espressione alterata di IGFBP6 è stata riportata in molteplici contesti di ricerca oncologica e metabolica, rendendola un nodo rilevante per studiare la disregolazione dell’asse IGF e i fenotipi dipendenti dai fattori di crescita.
IGFBP6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IGFBP6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IGFBP6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IGFBP6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IGFBP6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.