Ig J Chain Plasmide Double Nickase (h): sc-403642-NIC

JCHAIN codifica la catena J delle immunoglobuline, un piccolo polipeptide secreto che consente la polimerizzazione di IgA e IgM collegando le regioni Fc e favorendo l’assemblaggio di IgA dimeriche e IgM pentameriche. Questa polimerizzazione sostiene l’immunità mucosale e il trasporto efficiente delle immunoglobuline polimeriche attraverso gli epiteli tramite il recettore delle immunoglobuline polimeriche, integrandosi con la differenziazione delle cellule B e i programmi secretori delle plasmacellule. L’espressione di JCHAIN è strettamente associata agli stati delle cellule secernenti anticorpi e agli esiti dello switch di classe, fornendo un indicatore funzionale della maturazione dell’immunità umorale. Livelli disregolati di JCHAIN sono stati associati ad alterazioni della difesa mucosale, discrasie immunitarie e neoplasie di origine B in cui risultano compromesse le vie di produzione e secrezione delle immunoglobuline.

Ig J Chain Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus JCHAIN nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di JCHAIN. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di JCHAIN. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con JCHAIN interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.