Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IFITM3 Plasmide Double Nickase (h): sc-403281-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IFITM3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IFITM3 Double Nickase Plasmid (h) e il IFITM3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IFITM3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IFITM3 Antibody (F-41): sc-100768
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IFITM3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403281-NIC | 20 µg | $410.00 |
IFITM3 (proteina transmembrana 3 indotta dall’interferone) è una proteina di membrana endolisosomiale stimolata dagli interferoni che limita l’ingresso dei virus con envelope riducendo la fusione di membrana e modulando il traffico endocitico. La sua espressione è regolata dalla segnalazione degli interferoni di tipo I/II e contribuisce ai programmi di difesa dell’immunità innata che rimodellano la composizione delle membrane e la dinamica delle vescicole durante l’infezione. IFITM3 è anche collegata alle risposte infiammatorie ed è stata studiata per i suoi ruoli nella segnalazione delle cellule immunitarie, nelle risposte allo stress e nella biologia tumorale attraverso effetti sull’organizzazione di membrana e sul traffico dei recettori. Differenze genetiche e di espressione di IFITM3 sono state associate a variabilità nella suscettibilità e nella gravità dei fenotipi di infezione virale, a supporto della sua rilevanza nella ricerca sulle interazioni ospite–patogeno.
IFITM3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IFITM3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IFITM3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IFITM3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IFITM3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.