Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HS3ST2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409766
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HS3ST2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HS3ST2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HS3ST2 Anticorpo (G-6): sc-514361
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HS3ST2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409766 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
HS3ST2 codifica a heparan sulfato–glicosamina 3-O-sulfotransferase 2, uma enzima localizada no complexo de Golgi que catalisa a 3-O-sulfatação de cadeias de heparan sulfato, gerando motivos de sulfatação raros que modulam a ligação a ligantes e a especificidade da sinalização. Ao moldar as interações entre heparan sulfato e proteínas, a HS3ST2 influencia a biologia da matriz extracelular e regula vias como FGF, WNT, VEGF e a sinalização mediada por quimiocinas, que controlam a adesão celular, a migração e o padrão tecidual. Alterações na expressão de HS3ST2 ou o seu silenciamento epigenético foram relatados em múltiplos contextos tumorais e são estudados em relação à invasão, à remodelação do microambiente associada à metástase e à resposta desregulada a fatores de crescimento. O seu papel na biossíntese de heparan sulfato também a relaciona a questões mais amplas da biologia do desenvolvimento e da inflamação, nas quais os padrões de sulfatação ajustam a ativação de receptores e a formação de gradientes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HS3ST2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HS3ST2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HS3ST2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HS3ST2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HS3ST2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HS3ST2 para a investigação da sinalização de HS3ST2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HS3ST2 críticos para a função HS3ST2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HS3ST2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HS3ST2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HS3ST2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HS3ST2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HS3ST2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HS3ST2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HS3ST2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HS3ST2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.