HoxD9 Plasmide Double Nickase (h): sc-404606-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxD9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxD9 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxD9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXD9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HoxD9 Antibody (H-2): sc-137134
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxD9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404606-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxD9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404606-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXD9 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxD9, un regolatore che si lega al DNA in modo sequenza-specifico e contribuisce a stabilire il patterning antero-posteriore e l’identità posizionale durante lo sviluppo embrionale. Nell’ambito delle reti regolatorie dei geni HOX, HoxD9 modula programmi trascrizionali che controllano differenziamento, morfogenesi e decisioni di destino cellulare, integrandosi con il controllo mediato dalla cromatina e con le vie di segnalazione dello sviluppo. Un’espressione disregolata di HOXD9 e un’attività alterata dei programmi HOX sono state associate a cambiamenti nella specificazione di linea e nei programmi di proliferazione osservati in molteplici contesti oncologici e in altri disturbi dello sviluppo. Queste caratteristiche rendono HOXD9 un bersaglio utile per studiare l’architettura dei circuiti trascrizionali, la logica enhancer–promotore e i meccanismi di misespressione dei geni dello sviluppo nelle cellule umane.
HoxD9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXD9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXD9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXD9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXD9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.