HoxC6 Plasmide Double Nickase (h): sc-403393-NIC

HOXC6 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxC6, un regolatore che si lega al DNA in modo specifico per sequenza e coordina la definizione dell’asse antero-posteriore e la specificazione di linea durante lo sviluppo. Nelle cellule umane, HoxC6 modula programmi trascrizionali legati alle decisioni sul destino cellulare, alla differenziazione e alla morfogenesi dei tessuti, integrandosi con reti regolatorie HOX più ampie e con il controllo dell’espressione genica mediato dalla cromatina. Un’espressione deregolata di HOXC6 è stata associata a stati di differenziazione alterati e alla riprogrammazione trascrizionale osservata in molteplici tipi di tumore, a sostegno della sua rilevanza per studi sulla segnalazione oncogenica e sulla disregolazione delle reti geniche dello sviluppo. In quanto fattore di trascrizione nucleare, HoxC6 è spesso studiato in contesti quali le dinamiche epitelio-mesenchimali, il controllo della proliferazione e i fenotipi di tipo staminale, attraverso la regolazione dei geni bersaglio a valle.

HoxC6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXC6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXC6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXC6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXC6 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.