HoxA9 Plasmide Double Nickase (h): sc-401583-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxA9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxA9 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxA9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXA9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HoxA9 Antibody (HOX5I043): sc-81291
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxA9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401583-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxA9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401583-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA9 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxA9, un regolatore chiave della patterning antero‑posteriore e dell’impegno di linea ematopoietica attraverso il legame al DNA in modo sequenza‑specifico e il controllo trascrizionale di programmi genici dello sviluppo. Nelle cellule umane, HoxA9 contribuisce a coordinare proliferazione e differenziamento modulando reti che intersecano il mantenimento delle cellule staminali, la maturazione mieloide e la regolazione trascrizionale dipendente dalla cromatina. Un’espressione deregolata di HOXA9 è spesso associata a stati trascrizionali leucemogenici e a un’autorinovamento alterato, rendendolo un nodo ampiamente studiato nei modelli di neoplasie ematologiche. La sua attività è inoltre analizzata in biologia dello sviluppo e in studi epigenetici per comprendere l’uso di enhancer dipendente dal contesto e i circuiti di regolazione genica.
HoxA9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXA9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXA9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXA9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXA9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.